Hogyan számoljuk meg a leukocitákat Gorjajev kamrájában. Gorjajev kamerája. Gyakorlati használat. Leukociták számlálása számlálókamrában
A teljes leukocitaszámot vérvizsgálat során végezzük. Határozza meg nemcsak a fehérvérsejtek számát, hanem más képződött elemek számát is. A leukociták számlálási módszerével nemcsak az immunrendszer eltérése, hanem más betegségek és állapotok is kimutathatók. A B-t a vörösvértestek száma, a hemoglobin, a vérlemezkék, a leukocita képlet, az ESR határozza meg.
A leukociták számának differenciált száma lehetővé teszi a populáció százalékos arányának meghatározását. Végezzen kutatást egy félautomata analizátoron. Ha az orvos kétségei maradnak, manuális vérkenet-vizsgálatot írnak elő. Segítségével megállapítható a sejtek állapota, azok kinézet.
A leukocita képletben a következő mutatókat határozzák meg:
- neutrofilek;
- bazofilek
- eozinofilek;
- monociták;
- limfociták.
Használva általános elemzés a vér nemcsak az immunrendszer állapotát tudja nyomon követni, hanem más olyan tényezőket is azonosítani, amelyek zavarokat okoznak a szervezetben. A következő jogsértéseket határozzák meg:
Nemcsak a leukocita képlet mennyiségi összetételét határozzák meg, hanem a fiatal vagy több felnőtt sejtek jelenlétét is. Ezért a képlet balra (fiatal sejtekre) vagy jobbra (érett sejtekre) történő eltolódásáról beszélnek.
A fiatal neutrofilek számának növekedése a következő esetekben fordulhat elő:
- gyulladás;
- a szövetek nekrózisa (nekrózisa);
- fertőzés;
- mérgezés;
- gyógyszerek szedése;
- a sejtek átmeneti fiziológiás növekedése.
A leukocita képlet jobbra tolódása a következő esetekben fordul elő:
- sugárbetegség;
- hipovitaminózis;
- veseelégtelenség;
- májelégtelenség;
- átmeneti változás a vér összetételében transzfúziót követően.
A leukociták számának számlálásának módszerei
Különböző módszerek léteznek a leukociták képletének differenciált megszámlálására. Az orvos választja ki őket a klinika felszereltségétől, a javasolt diagnózistól és a beteg állapotától függően.
- A leukociták abszolút számának differenciált számítása a nomogram szerint. Minden típusú sejt, százalékos arányuk feltárul. Határozza meg bármelyik indikátor megnövelt vagy csökkentett értékét. Negatív oldal- az alak, a méret, a sejtkárosodás nem észlelhető. A technikát egy félautomata analizátoron hajtják végre.
- A leukociták egyedi formáinak differenciált száma. Az elemzés akkor szükséges, ha a leukociták általános képletében megsértést észlelnek. Az orvos előírja a kezelést, kutatások segítségével figyelemmel kíséri annak tendenciáját. Ezt egy félautomata analizátoron végzik.
- A leukociták számának vizuális számlálása mikroszkóp és számlálókamra segítségével. Az orvos vizuálisan megszámolja a sejtek számát egy adott térfogatú folyadékban, értékeli azok alakját, méretét, integritását.
Leukocitaszám számlálókamrában
A leukocita sejtek számának megszámlálásához speciális kamerát használnak, amelyre egy tárgylemezt helyeznek. A számláló eszköz mélyedéseiben egy mikroszkopikus rács található nagy és kis négyzetekkel, amely szerint a formázott elemeket számolják. Az eszköznek sterilnek, munkára előkészítettnek kell lennie.
A vizsgálat több szakaszban történik.
- A leukociták számlálásához kapott vért 20-szorosra hígítjuk ecetsav.
- A kapott folyadékot üvegrúddal összegyűjtjük, és hozzáadjuk a kamrába.
- Irányítsa a mikroszkópot, számolja meg az összes leukocitát, ahogy balról jobbra, lefelé, jobbról balra mozog. A vérben lévő leukocitákat 100 négyzetben számolják, a vizeletben - a teljes rácson.
- A kapott adatokat behelyettesítjük a leukocitaszámláló képletbe, kiszámítva a leukociták teljes számát. Erre azért van szükség, mert a vér felhígult.
A kenet megtekintésekor az orvos nemcsak a sejtek számát számolja meg, hanem a megjelenésükre is figyel. Ha sérült vagy megváltozott sejteket észlelünk, ezt rögzítjük a vizsgálati űrlapon.
Fontos! A kamera fehérvérsejtszáma vér és vizelet mérésére használható.
Leukociták számlálására szolgáló oldatok és reagensek
A számlálókamra használatához előkészített reagensekre van szükség. Az orvosnak tudnia kell, hogyan készítsen vért a fehérvérsejtszám meghatározásához.
- Ecetsav oldat a leukociták számlálásához, 3-5%. Szükséges a vér hígításához, a vörösvértestek elpusztításához. A vörösvérsejtek zavarhatják a fehérvérsejtek megtekintését.
- metilénkék. A fehérvérsejtek átlátszóak, speciális reagensek használata nélkül láthatatlanok. A metilénfesték megfesti a sejteket, így láthatóvá válik a membránjuk és a belső szerkezetük. A laboráns megvizsgálhatja a sejten belüli szemcséket, sérüléseket, rendellenességeket, atipikusságot.
- Az etil-alkohol szükséges a számlálókamra és a tárgylemezek felületének fertőtlenítéséhez. Használat előtt az eszközt letöröljük, a vizsgálat befejezése után teljesen etil-alkoholba merítjük.
- Desztillált víz. Az etil-alkohol nyomainak eltávolításához szükséges.
Leukocitaszám az analizátoron
Az összes képződött elem pontos kiszámításához a leukociták száma per hematológiai elemző. Kiszámolja a sejteket 1 ml biológiai folyadékban. Kétféle elemző létezik:
- konduktometrikus (a készülék átvilágít a kialakított elemeken, kiszámítja azok különböző paramétereit, ami lehetővé teszi a vörösvértestek, vérlemezkék, fehérvérsejtek kiszámítását);
- fény-optikai (nem csak a cellák számát, hanem azok minőségét is kiszámítja).
A kutatáshoz friss vért vagy vizeletet gyűjtenek, 1 ml-t izolálnak. A leukociták megszámlálásához speciális reagensekkel kell hígítani, amelyek kiküszöbölik az eritrociták jelenlétét. A laboratóriumi asszisztens a biológiai folyadékot a készülékbe helyezi, amely maga számolja meg a formált elemeket. A készülék elkészíti az elemzés eredményét, amelyet elküld az orvosnak.
A leukocitaszámláló technika előnyei:
- az orvosi hibák kockázatának csökkentése;
- nagyszámú elemzés meghatározása egy munkanapon belül;
- sejtszám pontossága.
A módszer negatív oldalai:
- az eszköz magas ára, amelyet nem minden klinika engedhet meg magának;
- a sejtek állapotának vizuális ellenőrzésének hiánya.
Ha az analizátoron számoljuk, a leukociták LEU jelöléssel rendelkeznek, µl-ben (mikroliterben) kifejezve.
A maradék leukocitaszám
Az optikai megtekintéshez és a maradék leukociták számának számlálásához az ADAM készülék használható. Ehhez használjon fluoreszkáló anyagot, amely csak a leukocitákat jelöli. Nem vonatkozik a vérlemezkékre és az eritrocitákra.
A módszert több szakaszban hajtják végre:
- kapilláris vér vétele;
- biológiai folyadék kezelése propidium-jodiddal, amely csak a leukociták DNS-éhez kötődik (a vérlemezkék és az eritrociták nem rendelkeznek maggal);
- a chip behelyezése a készülékbe;
- a készülék a fluoreszkáló fényre fókuszál, a sejteket rögzíti és megszámolja, és a képük megjelenik.
A módszer rendkívül informatív, mivel pontos eredményeket ad. Az orvos élőképet tekinthet meg a sejtről.
Fehérvérsejtszám a kenetben
A leukociták kenetben történő megszámlálásához friss kapilláris vérre van szükség. A bioanyag-mintavétel után közvetlenül egy tárgylemezre kenik. Ezután a Romanovsky-Giemsa szerinti festést végezzük. A módszerrel minden sejtet rögzítünk és megfestünk, további reakciók nem lépnek fel.
A fedőlemezeken lévő leukociták számát mikroszkóp segítségével megszámoljuk. Merítőolajat alkalmazunk, hogy minden sejt jobban látható legyen. A mikroszkóp átkerül az immerziós objektívre.
A mintában a cellák egyenetlenül helyezkednek el:
- a periférián - monociták és granulociták;
- a központban - limfociták.
A mikroszkóp balról jobbra, lefelé, jobbról balra mozgatható. A kenetet addig számoljuk, amíg az összes sejtszám el nem éri a 100 egységet. A leukociták minden típusára vonatkozó adatokat a vizsgálati űrlapon kell feltüntetni.
Leukociták száma a vizeletben
Végezze el a vizeletben lévő képződött elemek és egyéb képződmények tanulmányozását a leukociták számlálásának módszerével Nechiporenko szerint. Ehhez a biológiai folyadékot kémcsőbe helyezzük, centrifugáljuk. Ezzel a módszerrel minden formáció kicsapódik. Elviszik, áthelyezik a számlálókamrába.
A leukocita képlet a legfontosabb vizsgálat, amely lehetővé teszi a szervezet reaktivitásának azonosítását a fertőző ágens bejutására adott válaszként. A betegség látens formában is lezajlik, a fehérvérsejtek számlálása során gyanítható. A vérvizsgálat lehetővé teszi az immunitás állapotának azonosítását, a gyulladásos folyamatok megjelenését a belső szervekben. A leukociták vizeletben történő meghatározása a húgyúti rendszer rendellenességeit tárja fel.
Ekaterina Belikova, a laboratóriumi diagnosztika doktora, kifejezetten a helyszínre
Hasznos videó
Felszerelés: egyéni védőfelszerelés, tesztanyag, tálca, mikroszkóp, Gorjaev kamera, Pasteur pipetta, kémcsőállvány, adagolók hegyekkel, szalvéták, tartályok fertőtlenítő oldattal.
Reagens: 3%-os ecetsav oldat.
Művelet algoritmus:
1. Mossa meg és szárítsa meg a kezét, vegyen fel kesztyűt.
2. Száraz, tiszta kémcsőbe mérjen 0,4 ml 3%-os ecetsavat.
3. Mérjen ki 0,02 ml teljes vért, és törölje le a kézidarab felületét egy kendővel.
4. Adjon 0,02 ml teljes vért a kémcsőbe 3%-os ecetsavval.
5. Keverje össze a cső tartalmát, és hagyja állni számlálásig (5 perc).
6. Készítse elő a Gorjajev-kamrát a leukociták számlálására.
7. A kamra feltöltése előtt keverje újra a tubus tartalmát.
8. Helyezzen egy csepp hígított vért Pasteur pipettával a kamra középső lemezére a fedőlemez szélén.
9. Tegye a kamerát a színpadra 1-2 percre, amíg a folyadék mozgása leáll benne és a vörösvértestek leülepednek. Kapcsolja be a mikroszkópot.
11. Számítsa ki a leukocitákat a képlet szerint 1 liter vérben, és írja le az űrlapba!
X= (a x 20)/(100 x b)
ahol X a leukociták száma 1 µl vérben; a - a megszámlált leukociták száma; b - egy nagy négyzet térfogata 1/250 mm3;
20 - vérhígítás;
100 azoknak a nagy négyzeteknek a száma, amelyekben a számolás történt.
Végső képlet
X \u003d a x 50 x 106 (1 literben)
12. Értékelje a kapott eredményeket a "normál-patológia" pozíciójából.
13. Tisztítsa meg a munkahelyet.
Norma-patológia:
Eritrociták - a norma
Leukociták - a norma
458 - eritrociták
137 - fehérvérsejtek
137 * 50 * 106 \u003d 6850 * 106 = 6,85x103 / μl \u003d 6,85x109 / L
X=4,58x1012/L
Hematológia
4) A proliferatív sejtek osztálya. Ezek morfológiailag felismerhető sejtek. Mivel a morfológia eltér az előző 3 osztálytól. Nagy, laza magjuk van, két-négy sejtmaggal, a citoplazma bazofil
A korábbi sejtekkel ellentétben robbanás
5) érő sejtek egy osztálya, amely jellemző a vérképző sorozatukra
Az eritrocita sorban egytől 5-ig többféle sejt lehet
6) az érett sejtek osztálya
A perifériás vérben, vagy az érrendszeren kívül működnek?
Az egyes cellák neve
Hematológia
Vérszegénység (vérszegénység) - olyan kóros állapotok és betegségek kiterjedt csoportját képviselik, amelyekre közös vonásai a vér oxigénszállító képességének csökkenése.
A vérszegénység a betegségek egy csoportja közös pillanat amelyre a koncentráció csökkenése hemoglobin a vérben, ritkábban a szám egyidejű csökkenésével eritrociták(eritropénia).
Anémia osztályozása:
6. A fejlődés mechanizmusa szerint:
1. Vérvesztés miatti vérszegénység.
2. Vérszegénység a fokozott vérpusztulás miatt (hemolitikus).
3. Vérszegénység a vérképződés károsodása miatt.
7. Hematopoiesis típusa szerint
1. Normoblasztikus
2. Megaloblasztikus
8. Színindex szerint:
1. Normokróm, ha a színindex 0,82-1,05
2. Hipokróm, ha a színindex kisebb, mint 0,82
3. Hiperkróm, ha a színindex 1,05 felett van
9. A vörösvértestek mérete szerint:
1. Normocita (7,2-8,0 mikron normál átlagos vörösvértest-átmérővel)
2. Mikrocita (az eritrocita átlagos átmérője 7,2 mikron alatti)
3. Makrocita (az eritrociták átmérője több mint 8 mikron)
4. Megalocita (az eritrociták átmérője több mint 10 mikron)
5. A csontvelő regeneratív aktivitása szerint:
1. Regeneratív, megfelelő csontvelő funkcióval. Retikulociták száma a perifériás vérben 1,0-5,0%
2. Hiporegeneratív, a csontvelő csökkent regeneratív funkciójával. Retikulociták száma a perifériás vérben 0,2%
3. Hiperregeneratív, a csontvelő fokozott regeneratív funkciójával. A retikulociták száma a perifériás vérben meghaladja az 5,0%-ot
4. Regeneratív, az erythropoiesis éles gátlásával. A retikulocitákat a perifériás vérben általában nem észlelik
A mikrociták - az 5-6,5 mikron átmérőjű eritrociták túlsúlya a vérkenetekben - örökletes szferocitózisban, vashiányos vérszegénységben, talaszémiában figyelhetők meg. Mindezek a sejtek csökkentett térfogattal és kevesebb Hb-vel rendelkeznek. Az eritrociták méretének változásai a Hb szintézis megsértésén alapulnak.
A makrocitózist - a 9 mikronnál nagyobb átmérőjű eritrociták túlsúlyát a vérkenetekben - makrocita anémiával mutatják ki.
Megalocitózis - 11-12 mikron átmérőjű vörösvértestek vérkeneteiben jelenik meg, hiperkróm, középen megvilágosodás nélkül, ovális.
Anizocitózis - különböző méretű eritrociták jelenléte a vérkenetekben: kis átmérőjű eritrociták túlsúlyával - mikroanizocitózis, nagy átmérőjű eritrociták túlsúlyával - makroanizocitózis.
A vérszegénység korai szakaszában jelenik meg és az diagnosztikai jel
Poikilocytosis - különböző súlyosságú változások a vörösvértestek alakjában, amelyek eltérnek a korongostól. Ez az eritrociták patológiás változásának legfontosabb jele.
Színváltozás
Hematológia - gyakorlat
A leukociták száma a Goryaev-kamrában az egyik módja annak, hogy meghatározzák számukat a beteg vérében. A leukociták száma számos tényezőtől függ, beleértve a képződés sebességét, a csontvelőből való izolálást és a pusztulást. Mindezeket a folyamatokat közvetlenül befolyásolják az élettani tényezők. Ezért a leukociták számának állandó változása egészséges ember lehetséges. Ez különösen jól látható a reggeli és esti elemzések eredményeinek összehasonlításakor.
A leukociták számlálásának módszere a Goryaev-kamrában
Ez a csőmódszer a következő lépésekből áll:
- A kémcsövet megtöltjük 0,4 ml tiazinfestékes ecetsavval. Kapilláris pipettával 20 µl friss vért veszünk, és ugyanabba a csőbe fújjuk. A kapott keveréket alaposan összekeverjük.
- A kamrában lévő vékony üveglapot alaposan letöröljük, majd irizáló foltok képződnek.
- Ezután az ecetsavas vérből egy cseppet veszünk a kapott oldatból, és a lemez szélére visszük.
- Amikor a kamra megtelik, egy percig zavartalanul hagyjuk, hogy a fehérvérsejtek megtelepedjenek.
- Kis nagyításnál a leukocitákat megszámoljuk.
A helyes eredmények elérése érdekében egy speciális képlet segítségével számítják ki a leukociták számát 1 µl vérben. A norma 4-9 mutató 10 literenként.
Ha ezt a jelet meghaladó eredményt kapunk, akkor a betegnél leukocitózist diagnosztizálnak. Ha csökkenés van - leukopenia. De ez elméletben van, valójában meg kell nézni más mutatókat a betegség pontos meghatározása érdekében.
Háromféle képletet használnak a leukociták számlálására:
- 64 üres négyzethez
N = m x 4000 x 20/(64 x 16) = m x 78,13 ≈ m x 78
- 169 üres négyzetre
N = m x 4000 x 20 / (169 x 16) ≈ m x 29,6
- 100 üres négyzetre
N = m x 4000 x 20 / (100 x 16) ≈ m x 50.
A Goryaev kamera egy olyan eszköz, amely a legpontosabban meg tudja számolni a leukociták számát, valamint más hasonló részecskéket. Egy speciális vastag üvegből áll, téglalap alakú kamrával. Mikroszkopikus rácsot és vékony optikai üveget tartalmaz.
Ezt az eszközt a híres Goryaev Nikolai Konstantinovich professzor fejlesztette ki, aki a Kazan Egyetemen dolgozott. Sajátos rácsja adta a legpontosabb eredményeket, mint más híres tudósok kamerái.
Ami a kamera karbantartását illeti, itt is van néhány árnyalat. A munkaszünetekben a Goryaev-kamrának száraz helyen kell lennie. Amikor a munka elkészült, fel kell dolgozni. Ehhez a készüléket fél órára etil-alkoholba (70%) merítjük. Egy másik tisztítási lehetőség a formalin oldat (4%) egy órán keresztül. Az utolsó lépés a Goryaev-kamra desztillált vízzel való öblítése és puha ronggyal történő áttörlése.
Vannak esetek, amikor alacsony arányban a páciens testében minden rendben van. Ez arra utal, hogy a leukociták fő tartaléka a szövetekben található. Ezek az emberek hajlamosak arra különféle betegségek nagyon alacsony, ezért ritkán betegek. Alapvetően ez az öröklődés.
Leukopenia és leukocitózis
Feltételezhető az is, hogy a betegnél leukopenia diagnózisa van a Goryaev-kamera segítségével. Organikusra és funkcionálisra oszlik.
A funkcionális eltérések a következők:
- vírusos vagy bakteriális etiológiájú betegségek (bélfertőzések, hepatitis A stb.);
- reakció bizonyos gyógyszerekre;
- az izmok erős terhelése, stressz, étrend;
- a vér nem megfelelő tárolásával.
A szerves okok a következők:
- panmyelophthisis;
- leukémia;
- Hodgkin-kór;
- reumás betegség;
- ionos besugárzás;
- agranulocitózis.
A szervezet leukocitózissal reagál, ha endogén és exogén tényezők befolyásolják azt. A gyakorlatban a betegségek fiziológiás és kóros formáit különböztetik meg.
Fiziológiai okok a következők:
- az élelmiszer emésztése - ebben az időszakban a leukociták értéke élesen megnő, de három óra elteltével minden visszatér a normális kerékvágásba;
- stressz, idegek, fizikai munka, hipotermia vagy túlmelegedés, terhesség a harmadik hónaptól, menstruáció.
A patológiás okok a következők:
- vérrák;
- bizonyos fertőzések, valamint gyulladások (szepszis) szervezetbe jutása;
- sugárzás, a test mérgezése különféle mérgekkel, beleértve a rovarokat is;
- néhány gyógyszerek(neurotranszmitterek, biogén amin, szteroid hormonok stb.);
- szöveti nekrózis, súlyos szívbetegség, gangréna, vesekóma;
- bőséges vérzés (súlyos sebek, nőgyógyászati műtétek és így tovább).
Annak érdekében, hogy ne induljon el a betegség, rendszeresen részt kell venni a tervezett vizsgálatokon és elvégezni a szükséges vizsgálatokat. Az elvesztegetett idő tönkreteheti az egészségét, vagy elveszhet egy értékes életet.
A leukociták száma a vérben egyaránt függ képződésük sebességétől és a csontvelőből történő mobilizációjuktól, valamint hasznosulásuktól és szövetekbe (léziókba) való migrációjuktól, a tüdő és a lép általi befogásuktól. Ezeket a folyamatokat viszont számos élettani tényező befolyásolja, ezért az egészséges ember vérében a leukociták száma ingadozásoknak van kitéve: a nap vége felé emelkedik, a fizikai aktivitás, érzelmi stressz, fehérjebevitel, a környezeti hőmérséklet éles változása.
A leukociták számszerűsítése
A leukocitákat Goryaev-kamera és automatikus számlálók segítségével számolják meg.
Leukocitaszám Gorjajev kamerájával
A leukociták megszámlálására szolgáló vérvétel kémcső módszerével:
- 0,4 ml 3-5%-os metilénkékkel színezett ecetsavoldatot öntünk egy kémcsőbe. Kapilláris pipettával friss cseppből 20 μl vért veszünk (20-szoros hígítás), óvatosan reagenssel kémcsőbe fújjuk, majd a pipettát leöblítjük. A keveréket jól keverjük;
- tiszta és száraz fedőlemezt dörzsölnek a kamrához úgy, hogy az érintkezési ponton irizáló gyűrűk képződjenek;
- a kémcsőben hígított vért jól összekeverjük. Kerek üvegrúd végével vércseppet veszünk, és a kamra csiszolt üvegének széléhez visszük;
- a kamra feltöltése után 1 percig pihentetjük a leukocita ülepedéshez;
- a leukociták megszámlálása kis nagyítással (lencse × 8 vagy × 9, okulár × 10 vagy × 15) sötét látómező mellett (leengedett kondenzátor vagy szűkített membrán mellett);
- a kielégítő eredmények elérése érdekében a leukocitákat 100 nagy négyzetben megszámoljuk.
A nagy négyzet térfogatának és a vér hígítási fokának ismeretében keresse meg a leukociták számát 1 μl és 1 liter vérben. A nagy négyzet oldala 1/5 mm, területe 1/25 mm2, e négyzet feletti tértérfogat 1/250 mm3.
A leukociták számlálásának képlete:
ahol B a leukociták száma 100 nagy négyzetben;
P - hígítási fok (20).
A leukociták mennyiségi tartalma
Norma: 4,0–9,0 × 10 9 /L
A leukociták számának 9,0 × 10 9 / l feletti növekedését nevezzük
leukocytosis, számuk 4,0 × 10 9 /l alá csökkenése - leukopenia. Azonban akár 3,5 × 10 9 1 liter leukocitákban is előfordulhat számos személy esetében. A szakirodalom szerint az ilyen emberek immunrezisztenciája megnövekedett, és kevésbé valószínű, hogy megbetegednek, ami nyilvánvalóan azzal magyarázható, hogy immunreakciókat kell végrehajtani, hogy a szövetekben legyen tartalék leukocita, ahol 50-60 többször több belőlük, mint a véráramban. Nyilvánvaló, hogy a perifériás vérben alacsony leukocita-tartalommal rendelkező egészséges egyének szöveti tartalékai ennek megfelelően növekednek. Ez a jelenség az örökletes-családi természettel vagy a paraszimpatikus idegrendszer befolyásának növekedésével magyarázható.
A leukopenia lehet funkcionális és szerves.
A funkcionális leukopenia a hematopoiesis szabályozási zavarával jár, és megfigyelhető:
- néhány bakteriális és vírusos fertőzések(tífusz, influenza, himlő, rubeola, Botkin-kór, kanyaró);
- gyógyszerek hatására (szulfonamidok, fájdalomcsillapítók, görcsoldók, pajzsmirigy-ellenes, citosztatikus és egyéb gyógyszerek);
- izommunkával, idegen fehérje bejuttatásával, idegi és hőmérsékleti hatásokkal, éhezéssel, hipotóniás állapotokkal;
- hamis leukocitopénia a leukociták aggregációjával járhat a vér hosszan tartó, szobahőmérsékleten való tárolása során (több mint 4 óra).
A csontvelő apláziájából és zsírszövettel történő helyettesítéséből eredő szerves leukopenia akkor fordul elő, ha:
- aplasztikus anémia;
- agranulocitózis;
- a leukémia leukopéniás formája;
- a limfogranulomatózis egyes formái;
- ionizáló sugárzás;
- hipersplenizmus (elsődleges és másodlagos);
- kollagenózisok.
Leukocitózis
A leukocitózis a hematopoietikus rendszer reakciója a
exogén és endogén tényezők. Vannak fiziológiás és kóros leukocitózisok.
A fiziológiai leukocitózis:
- emésztőrendszer - étkezés után, különösen gazdag fehérjében; a leukociták száma nem haladja meg a 10,0-12,0 × 10 9 /l-t, és 3-4 óra elteltével normalizálódik;
- érzelmi stressz (adrenalin felszabadulás), erős fizikai terhelés, lehűlés, túlzott napozás ( leégés), számos hormon (katekolaminok, glükokortikoszteroidok stb.) bevezetése a terhesség második felében, a menstruáció alatt, és a leukociták egyenetlen eloszlása miatt következik be a véráramban.
A patológiás leukocitózist abszolút és relatívra osztják.
Abszolút leukocitózis- a leukociták számának növekedése a vérben több százezerre (100,0-600,0 × 10 9 /l és több).
- Leggyakrabban leukémiában: krónikus leukémiában - az esetek 98-100% -ában, akut leukémiában - 50-60% -ban. A leukocita sejtek arányának változása a csontvelő pontjában és a vérben a leukémia diagnózisának alapjául szolgál.
Relatív leukocitózis megfigyelt:
- akut gyulladásos és fertőző folyamatokban, kivéve tífusz, influenza, himlő, rubeola, Botkin-kór, kanyaró. A legnagyobb leukocitózis (legfeljebb 70,0-80,0 × 10 9 /l) szepszis esetén figyelhető meg;
- befolyásolta mérgező anyagok(rovarmérgek, endotoxinok), ionizáló sugárzás (közvetlenül az expozíció után);
- a kortikoszteroidok, adrenalin, hisztamin, acetilkolin, digitálisz készítmények hatására;
- szöveti lebontással (nekrózis), szívinfarktus, perifériás artériák trombózisa gangréna kialakulásával, égési sérülések, exudatív mellhártyagyulladás, szívburokgyulladás, urémia, májkóma;
- jelentős vérveszteség sebekben, belső, nőgyógyászati és egyéb vérzés.
A fertőző betegségekben a leukociták számának növekedése a legtöbb esetben a leukocita képlet balra tolódásával jár.
Számlálás módja a kamrában. A kémcső módszerrel előállított vér vétele és hígítása. 0,4 ml hígítófolyadékot és 0,02 ml kapilláris vért vezetünk egy kémcsőbe (lehetőleg Vidalevsky). Az így kapott hígítást gyakorlatilag 1:20-nak tekintjük. Hígítófolyadékként általában metilénkékkel színezett 3-5%-os ecetsavoldatot használnak (az ecetsav lizálja a vörösvértesteket, a metilénkék megfesti a leukociták magját). A Goryaev-kamra feltöltése előtt a hígított vérrel ellátott kémcsövet alaposan felrázzuk. A kamrát ugyanúgy töltik fel, mint a vörösvértestek számlálásakor.Sokkal kevesebb leukocita van, mint vörösvértest (1-2 nagy négyzetenként), ezért a pontosság érdekében a számlálást 100 nagy négyzetben (jelöletlen) végezzük. Számítás: 100 nagy négyzetben (1600 kicsiben) megszámoltuk a leukocitákat. Figyelembe véve, hogy egy kis négyzet térfogata 1/4000 mm3, és a vért 20-szorosra hígítjuk, kiszámítjuk a leukociták számát 1 μl vérben: 4000 × 20, és elosztjuk 1600-zal = a x 1/2. A gyakorlatban ahhoz, hogy 1 μl vérben megkapjuk a leukociták tényleges tartalmát, elegendő a számítás során kapott számot felére osztani, és 2 nullát rendelni.
A módszer átlagos hibája ± 7%.
Pontosabb (2-3%-os hiba) és tökéletes a leukociták számának mérése elektronikus eszközökkel. A leukociták számlálása a részecskeszámlálókban ugyanazon elv szerint történik, mint az eritrociták esetében. A vért előzetesen felhígítjuk, és némi eritrocita-lizáló reagenssel összekeverjük. A Technikon autoanalizátorban önmagában ecetsavoldatot használnak, a Coulter és Celloscope készülékekben szaponint vagy szapoglobint használnak, amelyeket hígítva (1:500, 1:700) adnak hozzá izotóniás nátrium-klorid-oldatban (6 csepp per). 20 ml tenyésztés).
A vér leukocitaszámát a perifériás vér festett keneteiben határozzák meg. Jobb, ha a kenet végéhez közelebb számolunk a legvékonyabb helyen, legalább 200 sejtet (a súlyos leukopénia kivételével), és ezután számítjuk ki az egyes leukociták százalékos arányát. Javasoljuk, hogy ugyanabban a sorrendben számoljon: számolja meg a kenet felső részén, a felét - az alsó részén, anélkül, hogy a legszélére és közepére menne, cikk-cakk mintázatban (3-4 látómező mentén). a kenet, 3-4 mező derékszögben a kenet közepére, majd 3-4 mező a széllel párhuzamos oldalra, ismét derékszögben felfelé és így tovább egy irányba).
Kenetek készítése. A gondosan megmosott és zsírmentes tárgylemezt (a szélét) hozzá kell érinteni egy vércsepphez az injekció beadásának helyén. Csiszolóüveggel kenetet készítünk, 45°-os szöget bezárva az üveglappal a csepp előtt. Az üveget ehhez a csepphez hozva megvárják, amíg a vér szétterül a bordáján, majd gyors, könnyed mozdulattal előreadják a csiszolóüveget, nem szakítják le a tárgyról, mielőtt az egész csepp kiszáradna.
A helyesen elkészített kenet sárgás színű (vékony), nem éri el az üveg széleit, és nyomban (bajuszban) végződik.
A száraz kenet festését előzetes rögzítés után végezzük. A legjobb rögzítést abszolút metilén-alkoholban (3-5 perc) vagy Nikiforov-féle abszolút etil-alkohol és éter egyenlő arányú keverékében (30 perc) érjük el.
A fő hematológiai színezékek közé tartozik a metilénkék és származéka - azúr I (metilén azúr) és azúr II (azúr I és metilénkék egyenlő arányú keveréke), savas - vízoldható sárga eozin.
● Színezés Romanovsky-Giemsa szerint. A Romanovsky-Giemsa festék (gyári készítmény) a következő összetételű: azúrkék II - 3 g, vízben oldódó sárga eozin - 0,8 g, metil-alkohol - 250 ml és glicerin - 250 ml. A munkafesték-oldatot 1 ml desztillált vízre számítva 1,5-2 csepp kész festéket készítünk. A festéket a lehető legmagasabb réteggel öntik a kenetre; színezés időtartama - 30-35 perc. Ezen időszak után a keneteket vízzel mossuk és levegőn szárítjuk. Ezzel a módszerrel jól meg lehet különböztetni a sejtmagot, de még ennél is rosszabb - a citoplazma neutrofil granularitását, ezért széles körben használják perifériás vérkenet festésére.
● May-Grunwald-Romanovsky-Giemsa kombinált festése Pappenheim szerint. A kész festéket pipettával egy rögzített kenetre öntjük - a May-Grunwald fixálót, amely eozin-metilénkék metilén-alkoholos oldata, 3 percig. 3 perc elteltével az oldatot fedő festékhez azonos mennyiségű desztillált vizet adunk, és további 1 percig folytatjuk a festést. Ezt követően a festéket lemossák, és a kenetet a levegőn megszárítják. Ezután a szárított kenetet frissen elkészített festékkel megfestjük vizesoldat Romanovsky 8-15 percig fest. Ezt a módszert tartják a legjobbnak, különösen a csontvelő-szúrások keneteinek festésére.
A perifériás vérben a leukociták számának a normál szint fölé emelkedését leukocitózisnak, a csökkenést leukopéniának nevezzük. A leukocitózist (leukopéniát) ritkán jellemzi az összes típusú leukociták számának arányos növekedése (csökkenése), például leukocitózis a vér megvastagodásával. A legtöbb esetben bármely sejttípus számának növekedése (csökkenése) következik be. Bizonyos típusú leukociták számának növekedése vagy csökkenése a vérben lehet relatív vagy abszolút, a leukociták össztartalmától függően - normál, magas vagy alacsony. A leukociták számának, egyes formáinak arányának és morfológiájának változása a kórokozó típusától és virulenciájától, a kóros folyamat természetétől, lefolyásától és prevalenciájától, valamint a szervezet egyéni reakciójától függ.