Лейкоциты в камере горяева. Камера Горяева. Практическое применение. Методика определения групп крови

– оптическое устройство для подсчета клеток или иных соизмеримых с ними частиц в заданном объеме жидкости. Состоит из толстого предметного стекла, имеющего прямоугольное углубление (камеру) с нанесенной микроскопической сеткой и тонкого покровного стекла. Камера разработана профессором Казанского университета Горяевым Н.К. Благодаря увеличенному объему сетки отличается большей точностью подсчета, по сравнению с другими камерами (Тома, Цейса, Тюрка, Бюркера).

Технические характеристики камеры Горяева

Размеры малого квадрата камеры Горяева 0,05×0,05 мм
Размеры большого квадрата камеры Горяева 0,2×0,2 мм
Глубина камеры 0,1 мм
Объем жидкости под 1 малым квадратом 0,00025 мм3 (мкл) = 1/4000 мм3 (мкл)
Объем жидкости под 1 большим квадратом 0,004 мм3 (мкл) = 1/250 мм3 (мкл)
Объем камеры Горяева 0,9 мм3 (мкл)

Описание сетки камеры Горяева

Сетка камеры Горяева состоит из 225 больших квадратов, из которых 25 разделены на 16 малых квадратов.

Рис 1. Сетка камеры Горяева

Рис 2. Большой (1) и малый (2) квадраты сетки камеры Горяева

Рис 3. 225 больших квадратов сетки камеры Горяева

Рис 4. 100 больших квадратов сетки камеры Горяева

Рис 5. Большой квадрат камеры Горяева разделенный на 16 малых квадратов.

Обслуживание камеры Горяева

Между работой камера должна храниться в сухом месте. После работы камера дезинфицируется погружением на 30 минут в 70% раствор этилового спирта, или на 60 минут в 4% раствор формалина, после чего камера промывается дистиллированной водой и протирается мягкой салфеткой.

Правило подсчета клеток в квадрате (правило Егорова)

В квадрате считаются клетки, лежащие внутри его, а также касающиеся левой и верхней границ. Клетки, касающиеся правой и нижней границ при подсчете не учитываются.

Методика подсчета лейкоцитов в камере Горяева

Развести образец исследуемой крови в 20 раз 3–5% раствором уксусной кислоты с метиленовым синим (например, 20 мкл крови и 380 мкл р-ра уксусной к-ты). Камеру и покровное стекло насухо протереть марлей. Недопускается использование для протирки ватных тампонов из-за остающихся на стекле волокон. Аккуратно притереть покровное стекло к камере, слегка надавливая на него до появления цветных колец Ньютона. Заполнить камеру разведенной кровью и выдержать 1 минуту для прекращения движения клеток. При малом увеличении (окуляр ×10, объектив ×8) посчитать лейкоциты в 100 больших квадратах. Расчет числа лейкоцитов осуществляют, исходя из разведения крови (20) и числа больших квадратов (100), по формуле: X = (a×250×20) / 100, где Х – число лейкоцитов в 1 мкл крови; а – число лейкоцитов, посчитанных в 100 больших квадратах камеры Горяева. Практически, после сокращений в формуле, количество посчитанных лейкоцитов умножают на 50.

Методика подсчета эритроцитов в камере Горяева

Развести образец исследуемой крови в 200 раз в 0,9% растворе NaCl или растворе Гайема (берется 20 мкл крови и 4 мл раствора). Камеру и покровное стекло насухо протереть марлей. Недопускается использование для протирки ватных тампонов из-за остающихся на стекле волокон. Аккуратно притереть покровное стекло к камере, слегка надавливая на него до появления цветных колец Ньютона. Заполнить камеру разведенной кровью и выдержать 1 минуту для прекращения движения клеток. При малом увеличении (окуляр ×10, объектив ×8) посчитать эритроциты в 5 больших квадратах разделенных на 16 малых (т.е. в 80 малых квадратах). Рекомендуется считать клетки в квадратах, расположенных по диагонали. Расчет числа эритроцитов осуществляют, исходя из разведения крови (200) и числа малых квадратов (80), по формуле: X = (a×4000×200) / 80, где Х – число эритроцитов в 1 мкл крови; а – число эритроцитов, посчитанных в 80 малых квадратах камеры Горяева. Практически, после сокращений в формуле, количество посчитанных эритроцитов умножают на 10 000.

Факторы, влияющие на правильность исследования лейкоцитов

Криоглобулинемия

Парапротеинемия

Нормобласты

Агрегаты тромбоцитов

Нелизированные эритроциты

Длительное хранение крови при комнатной температуре

Возраст Количество лейкоцитов

1 день 11.6 - 22.0

1 неделя 8.1.- 14.3

1 месяц 7.6 - 12.4

1 год 6.8 - 11.0

Взрослые 4.0 - 9.0

Методы определения количества лейкоцитов в крови .

- Подсчет количества лейкоцитов в счетной камере

- Подсчет лейкоцитов в гематологических анализаторах

Определение количества лейкоцитов в счетной камере.

Подсчет лейкоцитов под микроскопом проводят после лизирования эритроцитов в 100 больших квадратах счетной сетки и пересчитывают на 1 л крови, исходя из объема квадратов и разведения крови. Подсчет лейкоцитов должен быть произведен в течение 2-4 ч после взятия крови.

- При наличии в периферической крови ядросодержащих клеток красного ряд, они не лизируются и подсчитываются вместе с лейкоцитами. В этом случае, чтобы определить истинное количество лейкоцитов, из общего числа посчитанных клеток вычитают количество клеток красного ряда.

- Например: Общее количество лейкоцитов при подсчете в камере (или на анализаторе) -45х109/л. При подсчете лейкоцитарной формулы найдено, что на 100 лейкоцитов присутствует 50 эритробластов (нормобластов).

Рассчитываем истинное количество лейкоцитов в крови:

150 клеток - 45 х 109/л

100 клеток (лейкоциты) - X

Х =100*45*10/л /150 = 30*10/л

Таким образом, истинное число лейкоцитов в крови составляет 30 х109/л.

Основные источники ошибок при подсчете лейкоцитов в камере:

Неправильное соотношение объемов крови и уксусной кислоты, взятых в пробирку.

Неправильно подготовленный раствор уксусной кислоты (при концентрации большей, чем 5%, часть лейкоцитов может лизироваться, что приведет к занижению результата).

Длительное нахождение пробы при температуре выше 28°С, что может ускорить лизис лейкоцитов в образце и привести к занижению результата.

Неправильное заполнение камеры Горяева. Как и при подсчете эритроцитов, камеру необходимо оставлять на 1 минуту для оседания клеток.

Недостаточно хорошо отмытая после предыдущего определения камера Горяева. Оставшиеся в камере лейкоциты могут завышать результаты анализа.

Методы подсчета тромбоцитов

В счетной камере

Мазках крови

Гематологическом анализаторе

Каждая группа методов имеет преимущества и недостатки.

Подсчет тромбоцитов в камере достаточно точен, не требует для расчета количества эритроцитов. С другой стороны этот метод более трудоемкий, поскольку тромбоциты в нативном виде представлены мелкими и плохо контрастированными элементами. Недостаток метода - подсчет тромбоцитов в ближайшие часы после взятия крови.

Определение количества тромбоцитов в мазках крови значительно уступает по своей точности камерному методу или автоматическим счетчикам. Ошибки при подсчете в мазках крови могут быть обусловлены плохим качеством мазка и связанным с этим неравномерным распределением тромбоцитов, неточным определением количества эритроцитов крови. Существенное неудобство метода - необходимость одновременного подсчета тромбоцитов и эритроцитов в крови. Преимущество его - возможность исследования тромбоцитов в любое время, независимо от момента взятия крови.

Метод определения тромбоцитов с помощью гематологического анализатора позволяет достаточно точно определить количество тромбоцитов, их средний объем и распределение по объему.

Устройство камеры и сетки Горяева . Камера Горяева представляет собой толстое предметное стекло, прорезанное четырьмя поперечными бороздами. Борозды делят стекло на пластинки - две боковые и среднюю. Средняя пластинка на 0,1 мм ниже боковых. Она разделена поперечной бороздкой на 2 равные части. На каждой половине средней пластинки нанесена сетка Горяева. Принадлежностью" камеры служит шлифованное покровное стекло. Его следует наложить так, чтобы оно покрыло обе боковые и среднюю пластинки. Нажимая большими пальцами на края стекла, его притирают к боковым пластинкам до появления радужных колец (кольца Ньютона).

Так как боковые пластинки выше средней, между нею и покровным стеклом остается щель. Это и есть камера, в которую заливают разведенную кровь. Глубина камеры 0,1 мм.

Нанесенная на дно камеры сетка Горяева квадратная. Сторона ее - 3 мм, площадь--9 мм » . Сетка разграфлена на 225 больших квадратов-15 по горизонтали и 15 по вертикали. Часть больших квадратов (через два на третий) разделена на 16 малых квадратов. Сторона малого квадра­та равна 1/20 мм.

Техника подсчета . Правильное заполнение счетной камеры разведенной кровью обеспечивает точность под­счета форменных элементов. Перед заполнением камеры содержимое пробирки перемешивают, вращая ее между ладонями в течение 2 мин. Разведенную кровь наносят на среднюю пластинку камеры пастеровской пипеткой с баллоном или стеклянной палочкой, помещая ее около края покровного стекла. По закону капиллярности жид­кость затекает под стекло, заполняя камеру.

После заполнения камеру нужно положить на стол на 2-3 мин, пока движение жидкости в ней не прекратится, и клетки не расположатся неподвижно на фоне квадратов сетки. При заполнении камеры жидкость не должна стекать в борозды. Недопустимо попадание в камеру пузырьков воздуха.

Подсчет производят под малым" увеличением микро­скопа (об.8, ок.10 или 15), конденсор должен быть опущен, а диафрагма закрыта.

Возможные ошибки при подсчете:

Правила :

К данному квадрату принадле­жат клетки, находящиеся большей своей половиной внут­ри него;

Клетки, разделенные пограничной линией попо­лам, считают только на верхней и левой границе квадрата;

Клетки же, лежащие большей своей половиной вне данно­го квадрата не считают вовсе.

Принцип . Подсчет эритроци­тов под микроскопом в определенном количе­стве квадратов счетной сетки и пересчет на 1 мкл крови, исходя из объема квадратов и разведе­ния крови.

Реактивы . 0,9 % раствор хлорида натрия

Специальное оборудование . 1. Счетная камера Горяева. 2. Микроскоп.

Ход исследования . Разводят иссле­дуемую кровь в 200 раз. Для этого в сухую про­бирку отмеривают 4 мл реактива 1 или 2. Пипет­кой набирают 0,02 мл крови. Кончик пипетки вы­тирают фильтровальной бумагой или марлей, и кровь выдувают на дно пробирки; пипетку тща­тельно промывают в верхнем слое жидкости, повторно набирая ее и выдувая в пробирку, содержимое пробирки перемешивают и остав­ляют стоять до момента счета (рекомендуется считать эритроциты в ближайшие 2-3 ч после взятия крови, а при гемолитических и. В 12-дефи­цитных анемиях - сразу после взятия, так как эритроциты могут разрушиться). Недопустимо оставлять взятую кровь с несосчитанными эри­троцитами на следующий день, так как эритро­циты частично разрушаются.

Подготавливают счетную камеру : протирают насухо камеру с сеткой и покровное стекло, за­тем покровное стекло притирают к камере, слегка надавливая на стекло таким образом, чтобы по краям его появились радужные полосы (это сви­детельствует о требуемой высоте камеры - 0,1 мм).

Заполняют счетную камеру разведенной кровью : предварительно несколько раз тщатель­но встряхивают содержимое пробирки, затем пастеровской пипеткой или стеклянной палочкой отбирают каплю разведенной крови и подносят ее к краю покровного стекла, следя за тем, чтобы она равномерно без пузырьков воздуха запол­нила всю поверхность камеры с сеткой, не зате­кая в бороздки. Заполненную камеру оставляют в горизонтальном положении 1 мин (ДЛЯ ОСЕДАНИЯ эритроцитов).

Для подсчета эритроцитов - микроскоп (объектив на 8х, окуляр на 10Х), находят верхний левый край сетки. Счет производят в 5 больших квадратах, разделенных на 16 малых, т. е. в 80 малых квадратах.

Расчет количества эритроцитов:

производится по следующей формуле:

Х= а ■ 4000 ■ в

где X - количество форменных элементов в 1 мкл крови;

а - количество формен­ных элементов, сосчитанных в 80 малых квадратов;

б- количество сосчитанных малых квадратов;

в - степень разведения крови; 1\4000 мкл - объем малого квадрата; умножая на 4000, приводим к объему 1 мкл крови.

Сокращенная формула: Х= а х10000

Нормативные показатели:

У мужчин: 4,0-5,0 х 10 12

У женщин: 3,7-4,7 х 10 12

Клинико-диагностическое значение: Снижение числа эритроцитов в крови является одним из ос­новных лабораторных критериев анемии. Однако степень эритроцитопении широко варьирует при разных формах малокровия. Так, при наиболее распространенном заболевании - железодефицитной анемии на почве хронических кровопотерь - количество эритроцитов может быть нор­мальным или нерезко сниженным (3 10 6 - 3,6-10 6 в 1 мкл, или 3-10" 2 /л - 3,6-10 |2 /л). При острой кровопотере, В|2 -дефицитной анемии (в стадии рецидива), гипопластической анемии, гемолитических анемиях (в период криза) число эритроцитов в крови может значительно сни­зиться и достигнуть I -10 6 в 1 мкл, или 1 10 |2 /л и менее.

Повышение количества эритроцитов в кро­ви - эритроцитоз - может быть обусловлен многими причинами. Значительный эритроцитоз (6,5-10 6 -8,5-10 е в 1 мкл, или 6,5-10 |2 /л - 8,5-10 |2 /л крови) является одним из важных лабораторных симптомов эритремии. Другие гемобластозы миелопролиферативной природы (сублейкемический миелоз или миелофиброз и хронический миелолейкоз) реже сопровождают­ся эритроцитозом и только в начальной стадии заболевания.

Вторичный (симптоматический) эритроцитоз может сопутствовать широкому кругу различ­ных заболеваний и бывает абсолютным (связан­ный с усилением нормального эритропоэза) и от­носительным (гемоконцентрационный). Абсо­лютные эритроцитозы сопутствуют хроническим обструктивным заболеваниям легких, врожден­ным порокам сердца, первичной легочной гипертензии, синдрому Пиквика, наследственным гемоглобинопатиям, гипернефроидному раку, гемангиобластоме мозжечка, гепатоме, гормо­нально-активным опухолям, заболеваниям, со­провождающимся стенозом почечных артерий, заболеваниям ЦНС и др. Вторичные относитель­ные эритроцитозы связаны с нарушением гемо-концентрации и характеризуются нормальным объемом циркулирующих эритроцитов при сни­жении массы циркулирующей крови и массы циркулирующей плазме.

Патологические формы эритроцитов

Повышение числа эритроцитов - полицитемия, мо­жет быть истинной (опухолево-пролиферативный процесс) и симптоматической (реактивное раздражение эритропоэза, сгущение крови, нарушение нервной регуляции и пе­рераспределения). Понижение числа эритроцитов - ане­мия (постгеморрагическая, гемолитическая, вследствие нарушения кроветворения).

Качественные изменения эритроцитов . Анизоцитоз - изменение величины эритроцитов (эритроциты меньших размеров называются микроцитами; больших - макроцитами, эритроциты диаметром 12 мкм и более называются мегалоцитами). Пойкилоцитоз - изменение формы эритроцитов (грушевидные, серповидные - дрепаноциты, каплевидные, мишеневидные, с вытянутыми концами, шизоциты - обломки разрушенных эритроци­тов, акантоциты - эритроциты зубчатой формы, стоматоциты - эритроциты с просветлением в центре в виде узкой линейной полоски как форма рта, эхиноциты - эритроциты с множественными выростами, анулоциты - эритроциты в виде пустых колец). Анизохромия - из­менение интенсивности окраски эритроцитов в патологи­ческих случаях. Встречаются бледно окрашенные эрит­роциты - гипохромия, интенсивно окрашенные - гиперхромия. Эритроциты могут окрашиваться не только кислыми, но и основными красителями - полихромазия.

Обнаруживаются при патологии в периферической кро­ви ядросодержащие эритроциты: нормобласты, эритро­бласты и мегалобласты. Мегалоциты и мегалобласты ха­рактерны для анемии Аддисона-Бирмера.

В эритроцитах можно иногда обнаружить остатки ядерной оболочки - так называемые кольца Кебота и ядерные остат­ки - тельца Жолли при мегалобластных анемиях, отравле­нии гемолитическими ядами и др. При свинцовом отравлении и у людей, принимающих препа­раты крови, наблюдается базофильная пунктуация эритроци­тов (наличие точечной зернисто­сти). Сидероциты - эритроциты с включениями не гемоглобинового железа (ферритин, гемосидерин) в виде мелких гранул синего цвета.

2.5 Подсчет лейкоцитов

Лейкоциты. Норма – (4–9)х109/л крови. Их количество зависит от скорости образования в лимфатических узлах, селезенке и костном мозге, мобилизации из костного мозга, утилизации и миграции в ткани, захвата легкими и селезенкой, физиологических факторов. Основная функ­ция гранулоцитов (прежде всего нейтрофильных) фагоцитарная – захват и переваривание с помощью гидролитических ферментов чужеродного материала. При оценке количества лейкоцитов в клинике используется лейкоцитарная формула – процентное соотношение отдельных форм лейкоцитов. В норме эта величина постоянная.

Лейкоцитарная формула

Повышение числа лейкоцитов до нескольких десятков тысяч свидетельствует о лейкоцитозе и наблюдается при острых воспалительных и инфекционных заболеваниях, сопровождается сдвигом лейкоцитарной формулы влево. Повышение числа лейкоцитов до нескольких сотен тысяч указывает на лейкоз. При тяжелых инфекционных заболеваниях изменяется морфология нейтрофилов: отмечаются дегрануляция, вакуолизация и т. д. Уменьшение числа лейкоцитов ниже 4000 указывает на лейкопению , чаще агранулоцитоз. Уменьшение числа белых кровяных телец может быть связано с применением различных лекарств, повышенным радиоактивным фоном, урбанизацией и др. Нейтропения проявляется под влиянием цитостатиков, при вол­чанке, ревматоидном артрите, малярии, сальмонеллезе, бруцеллезе, как специфический синдром – при СПИДе и облучении.

Лейкоциты нейтрофильные. Содержание в крови – 50–75% (2,2–4,2)х109/л. Диаметр –10–12 мкм.

Ядро компактное, состоит из 3–4 сегментов, соединенных мостиками; цитоплазма с обильной зернистостью. При инфекциях и воспалениях ней­трофилы выполняют функцию макрофагов – клеток, способных к фагоцитозу.

Лейкоциты эозинофильные . Норма – 1–5% лейкоцитов, (0,1–0,3)х109/л. Клет­­ки крупнее нейтрофилов, диаметр до 12 мкм. Ядро состоит чаще из 2–3 сег­ментов. Цитоплазма слегка базофильная, содержит крупную, ярко окрашивающуюся эозином зернистость, дающую положительную оксидазную, пероксидазную, цитохромоксидазную, сукцинатдегидрогеназную, кислофосфатазную реакции. Способны к фагоцитозу, принимают участие в дезинтоксикации продуктов белковой природы и аллергических реак­циях организма.Эозинофилия характерна для гельминтозов, возможна на стадии выздоровления при инфекционных заболеваниях.

Лейкоциты базофильные. Содержание в крови – 0–1% (до 0,06х109/л). Диаметр от 8 до 12 мкм. Ядро широкое, неправильной формы. Цитоплазма содержит крупную зернистость, окрашивающуюся мета­хроматически в фиолетово-черные тона. Участвуют в аллергических реакциях (немедленного и замедленного типов): продуцируют гистамин и гепарин (группа гепариноцитов).

Моноциты/макрофаги. Норма – 2–10% лейкоцитов, (0,2–0,55)х109/л. Размеры от 12 до 20 мкм. Ядро крупное, рыхлое, с неравномерным распределением хроматина. В крови циркулируют недолго, переходят в ткани, трансформируясь в макрофаги, способны к амебовидному движению. Ведущие клетки иммунного ответа организма. Основная функция – эндоцитоз. Являются центральным звеном мононуклеарной фагоцитарной системы. Выполняют ряд цитокинзависимых функций: гемопоэтическую, иммуностимулирующую, провоспалительную, иммуносупрессивную и противовоспалительную.

Продукты секреции макрофагов:

Протеазы: активатор плазминогена, коллагеназа, эластаза, ангио­тензинконвертаза.

Медиаторы воспаления и иммуномодуляции: интерлейкин-1 (ИЛ-1), фактор некроза опухоли α, интерферон γ, лизоцим, фактор активации ней­трофилов, компоненты комплемента С1, С2, С3, С5, пропердин, факторы В, Д, ИЛ-3, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-10, ИЛ-12, ИЛ-15.

Факторы роста: КСФ-ГМ, КСФ-Г, КСФ-М, фактор роста фибробластов, трансформирующий фактор роста.

Фактор свертывающей системы и ингибиторы фибринолиза: V, VII, IX, X, ингибиторы плазминогена, ингибиторы плазмина.

Адгезивные вещества: фибронектин, тромбоспондин, протеогликаны.

Метод подсчета в камере

Взятие и разведение крови производят пробирочным методом. В пробирку (лучше видалевскую) вносят 0,4 мл разводящей жидкости и 0,02 мл капиллярной крови. Полученное разведение практически считается равным 1: 20. В качестве разводящей жидкости обычно употребляют 3-5%-ный раствор уксусной кислоты, подкрашенной метиленовым синим (уксусная кислота лизирует эритроциты, метиленовый синий окрашивает ядра лейкоцитов). Перед заполнением камеры Горяева пробирку с разведенной кровью тщательно встряхивают. Камеру заполняют так же, как для подсчета эритроцитов.

Лейкоцитов гораздо меньше, чем эритроцитов (1-2 на большой квадрат), поэтому для точности подсчет производят в 100 больших квадратах (неразграфленных).

Расчет: в 100 больших квадратах (1600 малых) сосчитано а лейкоцитов. Помня, что объем малого квадрата равен 1/4000 мм 3 , а кровь разведена в 20 раз, рассчитывают количество лейкоцитов в 1 мкл крови: 4000*20 и делят на 1600 = а*1/2. Практически для получения действительного содержания лейкоцитов в 1 мкл крови достаточно полученное при подсчете число разделить пополам и приписать 2 нуля. В среднем ошибка метода составляет ± 7%.

Более точным (ошибка 2-3%) и совершенным является подсчет лейкоцитов с помощью электронных аппаратов. Подсчет лейкоцитов в счетчиках частиц производят по тому же принципу, что и эритроцитов. Предварительно кровь разводят и смешивают с каким-либо лизирующим эритроциты реактивом. В автоанализаторе «Техникон» в качестве такового применяют раствор уксусной кислоты, в аппаратах «Культер» и «Целлоскоп» - сапонин или сапоглобин, которые добавляют разведенными (1: 500, 1: 700) в изотоническом растворе хлорида натрия (6 капель на 20 мл разведения).

12. Функции Гранулоцитов. Роль Т- и В- лимфоцитов в создании специфических механизмов иммунитета:

Главными клетками иммунной системы являются Т- и В-лимфоциты, которые циркулируют в системе кровотока и лимфотока, постоянно перемещаясь из одних органов иммунной системы в другие, обладают способностью выходить в ткани для выполнения защитных функций (рис.1).

В защитных реакциях специфического иммунитета кроме Т- и В-лим-фоцитов участвуют фагоцитирующие клетки (гранулоциты, моноциты, макрофаги), «естественные киллеры», тучные клетки, эндотелиальные и эпителиальные клетки, которые играют роль вспомогательных, взаимодействуя с Т- и В-лимфоцитами.

Иммунный ответ состоит из сложного ряда клеточных взаимодействий, активируемых попаданием в организм чужеродного антигенного материала. Сначала макрофаг захватывает несущий антигены организм. Затем макрофаг отщепляет часть антигена (пептид) и выводит его на свою поверхность, как бы предъявляя иммунным клеткам. Активация лимфоцита антигеном приводит к пролиферации и трансформации лимфоцитов.

Лимфоциты - это единственные клетки организма, способные специфически распознавать собственные и чужеродные антигены и отвечать активацией на контакт с конкретным антигеном. При весьма сходной морфологии лимфоциты делятся на две популяции, имеющие различные функции и продуцирующие разные белки.

Одна из популяций получила название В-лимфоциты. У человека В-лимфоциты созревают в костном мозге. В-лимфоциты распознают антигены специфическими рецепторами иммуноглобулиновой природы, которые по мере созревания В-лимфоцитов появляются на их мембранах. В-лимфоциты, способны распознавать и связывать белковые, полисахаридные и липопротеидные растворимые антигены.Главной функцией В-лимфоцитов является специфическое распознавание антигена. Узнавание антигена приводит к активации, пролиферации и преобразованию В-лимфоцитов в плазматические клетки - продуценты специфических антител - иммуноглобулинов. Таким образом формируется гуморальный иммунный ответ. Чаще всего В-лимфоциты для развития гуморального иммунного ответа нуждаются в помощи Т-лимфоцитов в виде продукции активирующих цитокинов.

Другая популяция получила название Т-лимфоциты в связи с дифференцировкой их предшественников в тимусе. Т-лимфоциты выполняют важнейшую функцию специфического распознавания и связывания антигена. Активированные антигенами Т-лимфоциты пролиферируют и превращаются в различные субпопуляции, участвующие далее во всех формах иммунного ответа. Активированный Т-лимфоцит так же продуцирует и выделяет цитокины, усиливающие процессы увеличения количества самих Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов и макрофагов.

Среди зрелых Т-лимфоцитов различают две основные субпопуляции: Т-хелперы (CD4+) и Т- киллеры - цитотоксические Т-лимфоциты (CD8+). Маркировка «CD» является характеристикой «поверхностного фенотипа клетки» - «кластер дифференцировки» (от английского clusters of differentiation - CD).

Имеется еще один тип лимфоцитов - большие гранулярные лимфоциты, отличающиеся от меньших по величине Т- и В-лимфоцитов не только особенностями структуры, но и отсутствием антигенраспознающего рецептора. Эти клетки получили название «естественные киллеры» : они способны убивать инфицированные разными вирусами клетки-мишени или опухолевые клетки (см. табл. 1).

Таблица 1. Классификация лимфоцитов человека

Т-клетки разрушающе действуют на следующие объекты:

1. Злокачественные клетки.

2. Клетки, инфицированные микроорганизмами.

3. Трансплантированные органы и ткани.

В атаке участвует вся клетка, поэтому ответ называется клеточным иммунитетом.

Таким образом, существует два главных типа иммунного ответа:

· Клеточный иммунитет это функция T-лимфоцитов.

· Гуморальный иммунитет – с участием В-лимфоцитов.

Существует еще одна субпопуляция Т-лимфоцитов: регуляторные Т-лимфоциты, Т-регуляторные клетки Тreg), Т-супрессоры - центральные регуляторы иммунного ответа. Основная их функция - контролировать силу и продолжительность иммунного ответа через регуляцию функции Т-эффекторных клеткок (Т-хелперов и Т-цитотоксических клеток).

Рис. 2. Общая схема иммунного ответа

Феномен супрессии иммунного ответа был известен давно, но не были известны его механизмы. Поэтому было предположено существование специфических клеток Т-супрессоров, однако существование этих клеток долгое время не было подтверждено экспериментально. Лишь в конце 1990-х и в начале 2000-х годов было показано существование определенных Т-клеток, которые характеризовались фенотипом CD25+FOXP3+ и эффективно подавляли иммунный ответ.

13. иммунитет, его неспецифические и специфические механизмы:

Адаптивный (устар. приобретённый, специфический) иммунитет имеет способность распознавать и реагировать на индивидуальные антигены, характеризуется клональным ответом, в реакцию вовлекаются лимфоидные клетки, имеется иммунологическая память, возможна аутоагрессия.

Классифицируют на активный и пассивный.

• Приобретённый активный иммунитет возникает после перенесённого заболевания или после введения вакцины.
• Приобретённый пассивный иммунитет развивается при введении в организм готовых антител в виде сыворотки или передаче их новорождённому с молозивом матери или внутриутробным способом.

Другая классификация разделяет иммунитет на естественный и искусственный.

• Естественный иммунитет включает врождённый иммунитет и приобретённый активный (после перенесённого заболевания), а также пассивный иммунитет при передаче антител ребёнку от матери.
• Искусственный иммунитет включает приобретённый активный после прививки (введение вакцины) и приобретённый пассивный (введение сыворотки).

Врождённый (неспецифический) иммунитет обусловлен способностью идентифицировать и обезвреживать разнообразные патогены по наиболее консервативным, общим для них признакам, дальности эволюционного родства, до первой встречи с ними. В 2011 году была вручена Нобелевская премия в области медицины и физиологии за изучение новых механизмов работы врождённого иммунитета (Ральф Стайнман, Жюль Хоффман и Брюс Бётлер).

Осуществляется большей частью клетками миелоидного ряда, не имеет строгой специфичности к антигенам, не имеет клонального ответа, не обладаетпамятью о первичном контакте с чужеродным агентом.

14. Мононуклеарно-фагоцитарная система:

Система мононуклеарных фагоцитов (греч. monox один + лат. nucleos ядро: греч. рhagos пожирающий, поглощающий + гистол. суtus клетка; синоним: макрофагальная система, моноцитарно-макрофагальная система) - физиологическая защитная система клеток, обладающих способностью поглощать и переваривать чужеродный материал. Клетки, входящие в состав этой системы, имеют общее происхождение, характеризуются морфологическим и функциональным сходством и присутствуют во всех тканях организма.

Основой современного представления о cистема мононуклеарных фагоцитов является фагоцитарная теория, разработанная И.И. Мечниковым в конце 19 в., и учение немецкого патолога Ашоффа (К. А.L. Aschoff) о ретикулоэндотелиальной системе (РЭС). Первоначально РЭС была выделена морфологически как система клеток организма, способных накапливать витальный краситель кармин. По этому признаку к РЭС были отнесены гистиоциты соединительной ткани, моноциты крови, клетки Купфера печени, а также ретикулярные клетки кроветворных органов, эндотелиальные клетки капилляров, синусов костного мозга и лимфатического узлов. По мере накопления новых знаний и совершенствования морфологических методов исследования стало ясно, что представления о ретикулоэндотелиальной системе расплывчаты, не конкретны, а в ряде положений просто ошибочны. Так, например, ретикулярным клеткам и эндотелию синусов костного мозга и лимфатических узлов длительное время приписывалась роль источника фагоцитирующих клеток, что оказалось неверным.

В настоящее время установлено, что мононуклеарные фагоциты происходят из циркулирующих моноцитов крови. Моноциты созревают в костном мозге, затем поступают в кровяное русло, откуда мигрируют в ткани и серозные полости, становясь макрофагами. Ретикулярные клетки выполняют опорную функцию и создают так называемое микроокружение для кроветворных и лимфоидных клеток. Эндотелиальные клетки осуществляют транспорт веществ через стенки капилляров. Непосредственного отношения к защитной системе клеток ретикулярные клетки и эндотелий сосудов не имеют. В 1969 г. на конференции в Лейдене, посвященной проблеме РЭС, понятие «ретикулоэндотелиальная система» было признано устаревшим. Вместо него принято понятие «система мононуклеарных фагоцитов». К этой системе относят гистиоциты соединительной ткани, клетки Купфера печени (звездчатые ретикулоэндотелиоциты), альвеолярные макрофаги легких, макрофаги лимфатических узлов, селезенки, костного мозга, плевральные и перитонеальные макрофаги, остеокласты костной ткани, микроглию нервной ткани, синовиоциты синовиальных оболочек, клетки Лангергаиса кожи, беспигментные гранулярные дендроциты. Различают свободные, т.е. перемещающиеся по тканям, и фиксированные (резидентные) макрофаги, имеющие относительно постоянное место.

Макрофаги тканей и серозных полостей, по данным сканирующей электронной микроскопии, имеют форму, близкую к сферической, с неровной складчатой поверхностью, образованной плазматической мембраной (цитолеммой). В условиях культивирования макрофаги распластываются на поверхности субстрата и приобретают уплощенную форму, а при перемещении образуют множественные полиморфные псевдоподии.

Характерным ультраструктурным признаком макрофага служит наличие в его цитоплазме многочисленных лизосом и фаголизосом, или пищеварительных вакуолей. Лизосомы содержат различные гидролитические ферменты, обеспечивающие переваривание поглощенного материала. Макрофаги - активные секреторные клетки, которые освобождают в окружающую среду ферменты, ингибиторы, компоненты комплемента. Основным секреторным продуктом макрофагов является лизоцим. Активированные макрофаги секретируют нейтральные протеиназы (эластазу, коллагеназу), активаторы плазминогена, факторы комплемента, такие как С2, С3, С4, С5, а также интерферон.

Клетки cистема мононуклеарных фагоцитовобладают рядом функций, в основе которых лежит их способность к эндоцитозу, т.е. поглощению и перевариванию инородных частиц и коллоидных жидкостей. Благодаря этой способности они выполняют защитную функцию. Посредством хемотаксиса макрофаги мигрируют в очаги инфекции и воспаления, где осуществляют фагоцитоз микроорганизмов, их умерщвление и переваривание. В условиях хронического воспаления могут появляться особые формы фагоцитов - эпителиоидные клетки (например, в инфекционной гранулеме) и гигантские многоядерные клетки типа клеток Пирогова - Лангханса и типа клеток инородных тел. которые образуются путем слияния отдельных фагоцитов в поликарион - многоядерную клетку. В гранулемах макрофаги вырабатывают гликопротеид фибронектин, который привлекает фибробласгы и способствует развитию склероза.

Клетки cистема мононуклеарных фагоцитов принимают участие в иммунных процессах.

Так, непременным условием развития направленного иммунного ответа является первичное взаимодействие макрофага с антигеном. При этом антиген поглощается и перерабатывается макрофагом в иммуногенную форму. Иммунная стимуляция лимфоцитов происходит при непосредственном контакте их с макрофагом, несущим преобразованный антиген. Имунный ответ в целом осуществляется как сложное многоэтапное взаимодействие Г- и В-лимфоцитов с макрофагами.

Макрофаги обладают противоопухолевой активностью и проявляют цитотоксические свойства в отношении опухолевых клеток. Эта активность особенно выражена у так называемых иммунных макрофагов, осуществляющих лизис опухолевых клеток-мишеней при контакте с сенсибилизированными Т-лимфоцитами, несущими цитофильные антитела (лимфокины).

Клетки cистема мононуклеарных фагоцитов принимают участие в регуляции миелоидного и лимфоидного кроветворения. Так, островки кроветворения в красном костном мозге, селезенке, печени и желточном мешке эмбрионе формируются вокруг особой клетки - центрального макрофага, организующего эритропоэз эритробластического островка. Клетки Купфера печени участвуют в регуляции кроветворения путем выработки эритропоэтина. Моноциты и макрофаги вырабатывают факторы, стимулирующие продукцию моноцитов, нейтрофилов и эозинофилов. В вилочковой железе (тимусе) и тимусзависимых зонах лимфоидных органов обнаружены так называемые интердигитирующие клетки - специфические стромальные элементы, также относящиеся к cистемs мононуклеарных фагоцитов, ответственные за миграцию и дифференцировку лимфоцитов.

Обменная функция макрофагов заключается в их участии в обмене железа.

В селезенке и костном мозге макрофаги осуществляют эритрофагоцитоз, при этом в них происходит накопление железа в форме гемосидерина и ферритина, которое питом может реутилизироваться эритробластами.

15. Лейкоцито и его виды. Лейкопения:

Лейкоцитарная формула - это процентное соотношение отдельных видов лейкоцитов в периферической крови. Лейкоцитарная формула видоизменяется определенным образом, типично для каждого определенного заболевания. Лейкоциты при различных заболеваниях, чаще при инфекциях, изменяются в количественном отношении.

Повышение числа лейкоцитов - лейкоцитоз, снижение - лейкопения.

Лейкоцитоз может быть физиологическим и патологическим, первый возникает у здоровых людей, второй - при каких-то болезненных состояниях. Лейкоцитоз - изменение клеточного состава крови, характеризующееся повышением числа лейкоцитов. Норма лейкоцитов в крови - 3,5 - 8,8?109/л, но этот показатель может отличаться в большую или меньшую сторону, в зависимости от лаборатории и используемых методов.

Лейкоцитоз может быть физиологическим и патологическим, первый возникает у здоровых людей, второй - при каких-то болезненных состояниях. К физиологическому относят алиментарный лейкоцитоз (после приема пищи), миогенный (после физического напряжения), лейкоцитоз беременных и др. Патологический лейкоцитоз обусловлен реакцией кроветворных органов на раздражение, вызванное инфекционными, токсическими, гнойно-воспалительными, лучевыми и другими агентами. Он наблюдается также при некрозе ткани (инфаркт миокарда, распад опухоли), после больших кровотечений, ранений, черепно-мозговых травм и др. Как правило, лейкоцитоз исчезает вместе с вызвавшей его причиной. Преходящий лейкоцитоз, характеризующийся появлением в крови незрелых лейкоцитов, называют лейкемоидной реакцией.

Лейкопения - уменьшение числа лейкоцитов в крови при некоторых инфекционных и других заболеваниях, а также в результате лучевого поражения, приема лекарственных препаратов или рефлекторных воздействий на костный мозг.

К лейкопении приводят лучевое поражение, контакт с рядом химических веществ (бензол, мышьяк, ДДТ и др.); прием медикаментозных препаратов (цитостатические средства, некоторые виды антибиотиков, сульфаниламидов и др.). Лейкопения возникает при вирусных и тяжело протекающих бактериальных инфекциях, заболеваниях системы крови.

При лейкопении необходимо точно выяснить причину заболевания. Наряду с вирусными инфекциями и заболеваниями кроветворящих органов причиной лейкопении может стать побочное действие аллопатических препаратов, так как ряд препаратов оказывает токсическое действие на костный мозг и может посредством аллергических механизмов вызывать лейкопению и агранулоцитоз.

Лечение заключается в назначении препаратов, стимулирующих развитие новых лейкоцитов или стимулирующих выброс созревающих лейкоцитов.

16. Регуляция лейкопоэза:

Регуляция лейкопоэза. Продукция лейкоцитов стимулируется лейкопоэтинами, появляющимися после быстрого удаления из крови большого количества лейкоцитов. Химическая природа и место образования в организме лейкопоэтинов еще не изучены. На лейкопоэз оказывают стимулирующее влияние нуклеиновые кислоты, продукты распада тканей, возникающие при их повреждении и воспалении, и некоторые гормоны. Так, под действием гормонов гипофиза - адренокортикотропного гормона и гормона роста - повышается количество нейтрофилов и уменьшается число эозинофилов в крови.

В стимуляции лейкопоэза большую роль играет нервная система. Раздражение симпатических нервов вызывает увеличение нейтрофильных лейкоцитов в крови. Длительное раздражение блуждающего нерва вызывает перераспределение лейкоцитов в крови: их содержание нарастает в крови мезентериальных сосудов и убывает в крови периферических сосудов; раздражение и эмоциональное возбуждение увеличивают количество лейкоцитов в крови. После еды увеличивается содержание лейкоцитов в крови, циркулирующей в сосудах. В этих условиях, а также при мышечной работе и болевых раздражениях в кровь поступают лейкоциты, находящиеся в селезенке и синусах костного мозга.

Для подсчета количества лейкоцитов кровь разводят в 20 раз при помощи реактива – жидкость Тюрка (3% уксусная кислота, подкрашенная метиленовым синим). Кислота разрушает оболочки клеток крови (эритроцитов и лейкоцитов), а метиленовый синий подкрашивает ядро лейкоцитов. Разведение можно делать в лейкоцитарных меланжерах (смесителях) или пробирках.

Для пробирочного способа разведения берут 0,4 мл жидкости Тюрка и добавляют 0,2 мл крови. Полученный раствор перемешивают, заправляют в камеру Горяева, помещают под микроскоп и подсчитывают лейкоциты в сетке Горяева.

Считают в 100 больших неразделенных квадратах. Количество лейкоцитов подсчитывают по формуле:

Х = А * 50

Получаем количество лейкоцитов в 1 мкл крови, например, 4500 (4,5 тыс. в 1 мкл) или 4,5*10 9 /л

Увеличение количества лейкоцитов называется лейкоцитоз . Лейкоцитоз бывает физиологический, медикаментозный и патологический.

Физиологический лейкоцитоз наблюдают при беременности, после приема пищи у моногастричных животных, а также после тяжелой физической нагрузки.

Медикаментозный лейкоцитоз возникает после парентерального введения животным белковых препаратов, вакцин, сывороток и др.

Патологический лейкоцитоз возникает всегда при воспалительных процессах, гнойно-некротических процессах, при инфекционных заболеваниях.

Уменьшение количества лейкоцитов называется лейкопения . Она встречается при истощении, лучевой болезни, при некоторых инфекционных и вирусных заболеваниях.

Изучение морфологии клеток крови

Морфологию клеток крови изучают в мазках крови под микроскопом. Для этого нужно приготовить мазок крови .

Используют чистое обезжиренное стекло.

При приготовлении мазка предметное стекло зажимается между большим и средним пальцами левой руки. В правой руке находится шлифованное покровное стекло. Для получения мазков хорошего качества необходимо брать небольшие капли крови.

Прислонив край покровного стекла к капле крови, которая находится на предметном стекле, дают возможность распределиться ей между двумя стеклами. Если стекла чистые и сухие, кровь, в силу капиллярности, распределяется почти моментально. Угол между покровным и предметным стеклом не должен превышать 45-50 0 . Покровное стекло фиксируется между пальцами правой руки так, чтобы кончик одного или обеих пальцев касался края предметного стекла. В этих случаях мазки получаются с ровными краями. Передвигая покровное стекло по предметному спокойно и не очень быстро, приготовляют мазок. Кровь при движении покровного стекла тянется за стеклом и не подвергается травмированию.

Погрешности при приготовлении мазка

Хорошо приготовленный мазок должен занимать 2/3 стекла и заканчиваться «метелкой».

После приготовления мазок должен высохнуть . Затем проводят его фиксацию с целью предотвращения разрушения клеток крови и закрепления их на стекле.

После фиксации проводят окраску мазков. Существует несколько способов окраски мазков крови:

Метод Романовского-Гимзе . Фиксированные этиловым спиртом (20 минут) или смесью Никифорова (этиловый спирт + этиловый эфир в соотношении 1:1) мазки заливают рабочим раствором красителя Романовского-Гимзе на 20-30 минут. Затем мазки промывают дистиллированной водой, высушивают и микроскопируют. Приготовление рабочего раствора: 2 капли заводского красителя на 1 мл дистиллированной воды.

Метод Май-Грюнвальда . Высушенный препарат фиксируют концентрированным раствором иозина Май-Грюнвальда 3 минуты, промывается дистиллированной водой. Затем мазки окрашиваются рабочим раствором в течение 10 минут, снова промываются дистиллированной водой, высушиваются и микроскопируются.

Есть несколько способов проведения микроскопии в зависимости от качества приготовления мазка.

Если мазок густой, то лучше микроскопировать в области «метелки» однопольным методом.

Равномерный мазок микроскопируют несколькими способами:

Ступенчатый (б)

Однопольный

Трехпольный (а)

Четырехпольный (в)

Мазок крови помещают под микроскоп, наносят каплю инверсионного масла и исследуют.

В первую очередь исследуют ЛЕЙКОЦИТЫ . В зависимости от характера и наличия зернистости в цитоплазме лейкоциты подразделяют на:

Гранулоциты, или зернистые: эозинофилы, базофилы, нейтрофилы; их цитоплазма содержит зернистость;

Агранулоциты, или незернистые: лимфоциты, моноциты; их цитоплазма не содержит зернистости.

При исследовании лейкоцитов выводят лейкограмму – это процентное соотношение отдельных видов лейкоцитов, записанное в определенном порядке. Сумма клеток лейкограммы должна быть равна 100.

* - абсолютное количество каждого вида лейкоцитов

Б азофилы . Ядро неправильной формы, в цитоплазме содержится зернистость темно-фиолетового цвета. В норме 0,1-0,2, чаще всего в лейкограмме их нет.

Э озинофилы . Содержат в цитоплазме розовую или ярко-красную зернистость (гранулы).

Н ейтрофилы . Их зернистость в цитоплазме практически не видна. В зависимости от зрелости нейтрофилы подразделяются на:

- М иелоциты – незрелая форма нейтрофилов; встречается только при сильной патологии. Содержат округлое ядро.

В процессе созревания происходит центральной вдавливание ядра à Ю ные нейтрофилы: имеет подковообразный вид, встречается только при патологии; незрелая форма нейтрофилов.

- П алочкоядерные нейтрофилы – в норме присутствуют в небольшом количестве (0-5). Относятся к незрелым формам нейтрофилов.

- С егментоядерные нейтрофилы – зрелая форма нейтрофилов. Ядро сегментировано, состоит из 2-5 сегментов, которые соединены тонкими перешейками. Если сегментоядерный нейтрофил «старый», то сегмента ядра отделяются друг от друга и ядро разрушается.

Л имфоциты – крупные клетки, практически целиком состоят из ядра, которое окрашено в темно фиолетовый цвет; цитоплазма светло-голубая, может быть незаметна. Зернистость цитоплазмы отсутствует.

У всех животных, кроме кошки, лимфоцитарный профиль крови; у кошки – нейтрофильный.

М оноциты – крупные клетки с ядром неправильной формы. Зернистости цитоплазмы нет.

Изменение лейкограммы происходит в трех направлениях:

1)Увеличение или уменьшение содержания отдельных видов лейкоцитов, т.е. видовые лейкоцитозы и видовые лейкопении.

2)Появление в лейкограмме молодых и незрелых форм нейтрофилов.

3)Возникновение патологических изменений в ядре и цитоплазме.

Видовые лейкоцитозы и видовые лейкопении

Увеличение базофилов называется базофилия .

Увеличение эозинофилов – эозинофилия .

Уменьшение эозинофилов – эозинопения .

Увеличение любого вида нейтрофилов называется нейтрофилия .

Уменьшение любого вида нейтрофилов называется нейтропения .

Увеличение лимфоцитов – лимфоцитоз .

Уменьшение лимфоцитов – лимфопения .

Увеличение моноцитов – моноцитоз .

Уменьшение моноцитов – моноцитопения .

Увеличение или уменьшение содержания какого-либо вида лейкоцитов может быть абсолютным и относительным.

Абсолютный видовой лейкоцитоз характеризуется увеличением абсолютного числа лейкоцитов данного вида при нормальном или повышенном общем количестве лейкоцитов в крови.

Относительный видовой лейкоцитоз сопровождается уменьшением общего количества лейкоцитов и преобладанием в крови лейкоцитов данного вида за счет уменьшения числа других форм клеток. При этом абсолютное число лейкоцитов преобладающего вида остается в пределах нормы.

Иногда помимо лейкограммы (считают в мазке крови) определяют общее число лейкоцитов и абсолютное содержание лейкоцитов каждого вида в 1 мкл крови (в камере Горяева).

При оценке лейкограммы используют термин «ядро лейкограммы ». Ядром лейкограммы являются нейтрофилы.

При увеличении процента П алочкоядерных лейкоцитов, а также М иелоцитов и Ю ных, говорят о сдвиге ядра влево .

При увеличении процента С егментоядерных лейкоцитов говорят о сдвиге ядра вправо .

Индекс ядерного сдвига определяют по формуле: ИС = .

При нормальном количестве палочкоядерных и сегментоядерных нейтрофилов индекс ядерного сдвига не превышает 0,06-0,08.

Ядерный сдвиг от 0,08 до 0,15 называется слабым левым сдвигом.

Ядерный сдвиг от 0,15 до 0,45 называется средним левым сдвигом.

Показатель ядерного сдвига ниже 0,05 указывает на сдвиг вправо .

Нейтрофилия – увеличение любого вида нейтрофилов.

Нейтрофилия со сдвигом ядра влево бывает нескольких разновидностей:

1. Нейтрофилия с простым регенеративным сдвигом характеризуется увеличением числа палочкоядерных нейтрофилов до 10-15%. Процент сегментоядерных клеток при этом в норме или слегла уменьшен. Общее число лейкоцитов увеличено незначительно. Эту разновидность нейтрофилии наблюдают при легко протекающих острых инфекциях, воспалительных и некротических процессах мягких тканей с доброкачественным течением (нагноившиеся раны, местные гнойные отеки).

2. Нейтрофилия с резким регенеративным сдвигом сопровождается появление в крови юных нейтрофилов и иногда миелоцитов, повышением процента палочкоядерных и понижением сегментоядерных нейтрофилов. Общее число лейкоцитов увеличено. Встречается при острых инфекциях, перитоните, воспалительных заболеваниях внутренних органов.

3. Нейтрофилия с дегенеративным сдвигом характеризуется увеличение процента палочкоядерных клеток, появлением дегенеративных форм нейтрофилов, уменьшением сегментоядерных. Общее число лейкоцитов при этом остается в норме или слегка понижено. Такое состояние развивается при длительном воздействии на кроветворные органы бактериальных ядов, химических веществ, при тяжелых гнилостных инвазиях, истощении.

Нейтрофилия со сдвигом ядра вправо характеризуется увеличением процента сегментоядерных нейтрофилов при нормальном или незначительно сниженном проценте палочкоядерных. Она может быть трех вариантов:

1. Незначительное повышение процента сегментоядерных на фоне небольшого лейкоцитоза – наблюдается после кровопотерь, при легком течении инфекционных заболеваний.

2. Увеличение процента сегментоядерных при нормальном или пониженном количестве лейкоцитов – у старых и истощенных животных.

3. Значительное возрастание сегментоядерных при понижении или отсутствии палочкоядерных и выраженной лейкопении – отмечают при хронических септических процессах, онкологии, тяжело протекающих инвазионных заболеваниях.

Нейтропения – понижение общего количества нейтрофилов. Нейтропения наблюдается при инфекционных и вирусных болезнях, протекающих с лимфоцитозом. Нейтропения на фоне гнойно-воспалительного процесса свидетельствует о снижении сопротивляемости организма и неблагоприятном течении заболевания.

Лимфоцитоз – увеличение количества лимфоцитов. Встречается преимущественно при вирусных и бактериальных заболеваниях, при болезнях крови и как относительный лимфоцитоз при нейтропении.

Лимфоцитопения – снижение процента лимфоцитов. Часто лимфоцитопения сопровождает нейтрофилию. Наиболее сильная лимфоцитопения регистрируется при иммунодефицитах.

Моноцитоз – увеличение процента моноцитов. Часто наблюдается на стадии выздоровления, при инфекционных и гнойно-воспалительных заболевнаиях, что указыает на хорошую сопротивляемость организма.

Базофилия – увеличение процента базофилов. Отмечают при гельминтозах, аллергических состояниях, хронических болезнях ЖКТ.

Исследование ЭРИТРОЦИТОВ

Эритроциты здоровых животных имеют следующие морфологические признаки: отсутствие ядра, окрашивание в красноватый или красновато-оранжевый цвет, форма двояковогнутого диска.

Основные отличия эритроцитов разных видов животных – различные размеры эритроцитов и интенсивность центральной зоны просветления.

Также морфологическим признаком, который может присутствовать у здоровых животных, является слипание эритроцитов в виде монетного столбика. Наиболее выражен монетный столбик в крови у лошадей и кошек. У КРС таких образований не наблюдается.

Патологические изменения эритроцитов чаще наблюдаются при анемиях и характеризуются:

1. Изменением размера – анизоцитоз , когда появляются эритроциты больше обычного (макрофитоз) и меньше обычного (микроцитоз);

2. Изменением формы – пойкилоцитоз – появление эритроцитов овальной, звездчатой или любой другой неправильной формы;

3. Изменением окраски – анизохромия – могут появляться гипохромные и гиперхромные эритроциты.

В эритроцитах могут быть обнаружены разные включения.